その理由は次のとおりです。
* RNA沈殿: エタノールは、溶液からRNAを沈殿させるのに役立ちます。 RNAは水に非常に溶けますが、エタノールを添加すると、RNAの溶解度が低下し、固体沈殿物として溶液から出てきます。
* 不純物を洗い流す: 洗浄ステップ中、エタノールは、RNAサンプルに存在する可能性のある塩、タンパク質、およびその他の細胞破片などの汚染物質を除去するのに役立ちます。
それがどのように機能するか:
1。脱水: エタノールは脱水剤であり、溶液から水を除去することを意味します。この水分の減少はRNAの溶解度を低下させ、降水につながります。
2。塩効果: ほとんどのRNA抽出プロトコルでは、エタノールの前に酢酸ナトリウムのような塩溶液が添加されます。この塩は、RNA分子の負電荷を中和するのに役立ち、水への可溶性が低くなり、沈殿する可能性が高くなります。
3。選択性: エタノールはRNAを沈殿させますが、DNAを効率的に沈殿させません。これにより、最終RNAサンプルにDNA汚染が比較的解放されていないことを確認するのに役立ちます。
重要な考慮事項:
* エタノール濃度: RNA抽出に使用されるエタノールの濃度は非常に重要です。濃度が低すぎるとRNAの沈殿には効果的ではない場合がありますが、濃度が高すぎると他の不要な成分の沈殿につながる可能性があります。 75%エタノールは、降水と洗浄に最適なバランスを提供するため、一般的に使用されています。
* 温度: エタノール沈殿は通常、RNAの分解を最小限に抑えるために、多くの場合氷上または4°Cで低温で行われます。
全体として、75%エタノールは、溶液からRNAを沈殿させ、汚染物質を洗浄することにより、RNA抽出に重要な役割を果たし、純粋で無傷のRNAの分離を確保します。