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DNAが制限酵素によってどのようにカットされるかを決定するものは何ですか?

制限酵素は、制限エンドヌクレアーゼとしても知られており、特定の配列でDNAを切断するタンパク質です。これらがどのように機能するかは次のとおりです。

1。認識シーケンス:

* 特異性: 各制限酵素は、DNAヌクレオチドの特定の短い配列を認識します。このシーケンスは通常、長さ4〜8個の塩基ペアであり、認識シーケンスと呼ばれます。 または制限サイト

* パリンドロミック性: 多くの認識シーケンスはパリンドロミックです。つまり、反対側のDNA鎖で同じ後方と前方を読みます。たとえば、酵素ECORIはシーケンスGAATTCを認識します。これは、相補鎖(CTTAAG)で右から左に読む場合も同じです。

2。切断:

* 切断: 制限酵素が認識シーケンスを見つけると、その配列内の特定のポイントでDNA分子を削減します。

* スティッキーエンドとブラントエンド: 制限酵素カットが「粘着性の端」または「鈍い端」のいずれかを生成する方法。

* 粘着端: 酵素はDNA鎖を異なる位置で切断し、同じ酵素で切断した他のDNA分子からの相補的なオーバーハングとベースペアをベースペアにすることができる短い一本鎖オーバーハングを残します。これは、組換えDNA分子の作成に役立ちます。

* 鈍い終了: 酵素は両方のDNAの鎖を同じ位置に切り、オーバーハングを残しません。

要約:

次の要因により、制限酵素がDNAをどのように削減するかが決定されます。

* 酵素の特定の認識シーケンス

* DNA分子内のその配列の位置。

* 酵素の特定の切断パターン(粘着端と鈍い端)。

例:

酵素ECORIはシーケンスGAATTCでDNAを切断し、粘着性の端を生成します。これは、その配列を含む任意のDNA分子を切断することを意味し、結果として得られるDNAフラグメントには、クローニングまたは他の遺伝子操作に使用できる一本鎖オーバーハングがあります。

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