基本材料:
* バッファ: これらは、抽出混合物のpHを維持する溶液であり、多くの場合、開いた細胞を破壊してDNAを保護するのに役立つ塩を含むことがよくあります。一般的な緩衝液には、Tris-HCl、EDTA、および硫酸ナトリウム(SDS)が含まれます。
* 洗剤: これらは細胞膜を分解してDNAを放出します。 一般的な洗剤には、SDSとTriton X-100が含まれます。
* 酵素:
* プロテアーゼ: これらは、DNAに結合したタンパク質を分解します。一般的なプロテアーゼには、プロテイナーゼKとトリプシンが含まれます。
* rnase: これらはRNAを分解し、DNAサンプルを汚染する可能性があります。
* エタノールまたはイソプロパノール: これらは、溶液からDNAを沈殿させるために使用されます。
* 塩: DNAの沈殿を促進するために使用されます。
* 水: DNAを再水和して溶解するために使用されます。
特定の方法の追加材料:
* フェノールクロロホルム: この混合物は、DNAを他の細胞成分から分離するために使用されます。
* 磁気ビーズ: これらは、磁気ビードベースのDNA抽出方法で使用されます。
* スピン列: これらは、DNAがサイズまたは電荷によって他の細胞成分から分離されているカラムベースのDNA抽出方法で使用されます。
* キット: 多くの商用DNA抽出キットが利用可能です。これにより、プロセスを簡素化し、特定の用途向けに最適化された試薬が提供されます。
典型的なDNA抽出プロトコルの例:
1。サンプル準備: ソース材料(血液、組織、植物など)が収集され、溶解のために準備されます。
2。細胞溶解: 細胞は、洗剤と酵素を含む溶解バッファーを使用して開いています。
3。タンパク質除去: プロテアーゼは、DNAに結合したタンパク質を分解するために追加されます。
4。 RNA除去: RNAを分解するためにRNaseが追加されます。
5。 DNA沈殿: エタノールまたはイソプロパノールを加えて、溶液からDNAを沈殿させます。
6。 DNA洗浄: 沈殿したDNAをエタノールまたはイソプロパノールで洗浄して、残りの不純物を除去します。
7。 DNAの再水和: DNAは緩衝液または水で再水和されます。
注意することが重要です:
*使用される特定の材料と手法は、サンプルの種類と意図したアプリケーションによって異なります。
*適切な方法を選択することは、抽出されたDNAの品質と量を確保するために不可欠です。
*化学物質や生物学的材料を操作する際には、安全注意を払う必要があります。
これは、DNA抽出材料の一般的な概要です。プロセスに関する具体的な詳細は、実験室と抽出されるDNAの種類によって異なる場合があります。