蛍光染色
* 蛍光色素： 生細胞の成分に結合または相互作用する特定の染料が使用されます。これらの染料は、特定の励起波長で照らされると、特定の波長で光を放出します。
* 一般的な染料：
* カルセインAM： 生細胞に入り、細胞内エステラーゼによって切断される色素は、細胞生存率を示す蛍光シグナルを生成します。
* ヨウ化プロピジウム（PI）： 膜が妥協した細胞のみに入る染料は、死んだ細胞または死にかけている細胞を示しています。
* 他の染料： 特定の細胞構造、オルガネラ、またはプロセスを標的とする他の多くの蛍光色素が利用可能です。
蛍光顕微鏡
* 励起光： 顕微鏡は、特定の波長の光を使用して、蛍光色素を興奮させます。
* 排出フィルター： フィルターは励起ライトをブロックし、放出された蛍光が検出器に到達することのみを可能にします。
* 画像形成： 検出器は蛍光信号をキャプチャし、色素が存在する細胞の画像を作成します。
観察可能な細胞：
カルセインAMのような生きた細胞に特異的にラベルを付ける染料を使用することにより、生存細胞を死んだ細胞または死にかけている細胞から区別できます。
細胞生存率のために蛍光顕微鏡を使用する利点：
* 高感度： 少数のライブセルを検出できます。
* 特異性： さまざまな染料を使用して、特定の細胞成分またはプロセスを標的とすることができます。
* 非侵襲的： 蛍光色素は、生理学を破壊することなく生細胞を観察するために使用できます。
考慮事項：
* 染料毒性： 一部の染料は、高濃度で細胞に有毒である可能性があるため、慎重な最適化が必要です。
* 光審査： 蛍光色素は、励起光にさらされると時間とともに衰退し、観測期間を制限します。
要約すると、蛍光顕微鏡は、死んだ細胞または死にかけている細胞から生存可能な細胞を観察および区別するための強力なツールであり、細胞の健康と機能に関する貴重な情報を提供します。
