1。適切な細胞培養システムの選択：
* 細胞タイプ： 異なるセルタイプには異なる要件があります。培養したい細胞の特定の特性（例えば、一次細胞、不死化細胞株、幹細胞）と、研究におけるそれらの目的を考慮してください。
* 培地培地： 細胞が繁栄するために必要な栄養素、成長因子、ホルモンを提供する媒体を選択します。
* 培養容器： 最適な細胞の成長と操作を可能にする適切なフラスコ、プレート、またはその他の容器を選択します。
2。滅菌技術：
* 無菌技術： これは、あなたの文化を損なう可能性のある細菌、菌類、または他の微生物からの汚染を防ぐために最も重要です。
* 滅菌： すべての機器、メディア、および試薬は、オートクレーブ、フィルター、またはその他の適切な方法を使用して滅菌する必要があります。
* クリーンワークスペース： 汚染のリスクを最小限に抑えるために、清潔で整理されたワークスペースを維持します。
3。細胞培養条件の維持：
* 温度： ほとんどの哺乳類細胞は、5％CO2の加湿インキュベーターで37°Cで培養されます。他の細胞タイプ（昆虫細胞など）の最適温度は異なる場合があります。
* 湿度： 湿度を維持すると、培地からの過度の蒸発が防止され、細胞に損傷を与える可能性があります。
* co2： CO2は、培地のpHを維持するために不可欠であり、細胞の生存と成長に不可欠です。
4。 定期的なメンテナンス：
* 摂食とサブカルチャー：
* 給餌： 培地を定期的に新鮮な媒体に置き換えて、必須の栄養素を提供します。
* サブカルチャー（パッセージ）： 細胞が成長するにつれて、それらは過密になります。サブカルチャー（細胞の分割）は、健康な成長を維持し、老化を防ぐために必要です。
* 細胞の成長の監視：
*顕微鏡を使用して、細胞の形態、コンフルエンシー、および汚染の兆候を監視します。
*細胞カウント方法（例：血球計、自動セルカウンターなど）を使用して細胞の成長を定量化します。
* ドキュメント： 日付、中程度の変更、継代、および観察された細胞形態の変化を含むすべての細胞培養手順の詳細な記録を保持します。
5。 高度な手法：
* 凍結保存： 液体窒素の凍結細胞は、それらを長期間保存することができます。
* トランスフェクション/トランスデューション： さまざまな技術を使用して、新しい遺伝物質を細胞に導入します。
* 分化： 細胞を誘導して、研究目的で特定の細胞タイプを採用します。
* 3D細胞培養： 3次元環境で細胞を栽培して、in vivo条件で模倣します。
6。 安全上の考慮事項：
* biosafety： 特に潜在的に危険な細胞を操作する場合、適切なバイオセーフティプロトコルに従ってください。
* 廃棄物処理： 規制に従って細胞培養廃棄物を適切に処分します。
* 個人用保護具： 汚染を防ぎ、危険な材料から身を守るために、適切な保護具（手袋、ラボコート、目の保護など）を着用してください。
リソース：
* atcc（アメリカ型カルチャーコレクション）： 細胞株と関連情報を取得するための貴重なリソース。
* 細胞培養マニュアル： 多くの包括的なマニュアルは、さまざまな細胞培養技術に関する詳細な情報を提供しています。
覚えておくべきキーポイント：
* 品質管理： 定期的に汚染を確認し、一貫した細胞の形態と成長を確保します。
* 再現性： 実験の再現性を確保するために、慎重に文書化されます。
* 倫理的考慮事項： 動物細胞培養の倫理的ガイドラインに従ってください。
研究室で細胞を維持することは、忍耐、細部への注意、継続的な学習を必要とするスキルです。これらのガイドラインを順守し、文化を一貫して監視することにより、あなたはあなたの研究の最適な細胞の成長と信頼できる結果を確実にすることができます。
