主な違い 順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーの違いは、順相クロマトグラフィーには非常に極性の高い固定相があり、 無極性 移動相に対し、逆相クロマトグラフィーには 無極性 固定相と極性移動相 さらに、順相クロマトグラフィーの固定相は主に純粋なシリカであり、移動相はクロロホルムなどの非水溶媒であり、逆相クロマトグラフィーの固定相は長い疎水性長鎖を有する修飾シリカ基質であり、移動相です。相は主に水、メタノールまたはアセトニトリルです。
順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーは、高圧下で動作する 2 種類の HPLC (高速液体クロマトグラフィー) 法です。一般に、通常の液体クロマトグラフィーに比べて分解能が高くなります。
対象となる主な分野
1. 順相クロマトグラフィーとは
– 定義、プロセス、重要性
2. 逆相クロマトグラフィーとは
– 定義、プロセス、重要性
3. 順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーの類似点
– 共通機能の概要
4. 順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーの違いは何ですか
– 主な相違点の比較
主な用語
HPLC、液体クロマトグラフィー、移動相、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、固定相
順相クロマトグラフィーとは
順相クロマトグラフィーは、HPLC 技術の一種です。これは、極性シリカである吸収剤に対する相互作用の程度に基づいて分析物を分離します。したがって、このタイプのクロマトグラフィーの固定相は親水性です。また、サンプル混合物中の親水性分子と親水性相互作用を行うこともできます。一般に、これらの相互作用には、水素結合、双極子間相互作用などが含まれます。したがって、より多くの非極性検体は固定相に長くとどまり、保持時間が長くなります。
図 1:順相および逆相クロマトグラフィー – プロパティ
さらに、順相クロマトグラフィーの移動相は無極性で非水です。したがって、混合物中の非極性または疎水性の検体は、プロセスの開始時に移動相で効果的に洗い流されます。一方、分析対象物の保持時間は、移動相の極性が増加するにつれて減少します。さらに、保持時間の再現性が低いことが、順相クロマトグラフィーの主な欠点です。基本的に、これはシリカの表面に水またはプロトン性有機溶媒の層が存在するために発生します。しかし、これは逆相クロマトグラフィーでは排除されます。
逆相クロマトグラフィーとは
逆相クロマトグラフィーは最近の HPLC の一種です。順相クロマトグラフィーと比較して、保持時間の再現性が向上しています。基本的に、この再現性の向上は、固定相を非極性にすることによって達成されます。これを行うには、シリカ固定相の表面を RMe2SiCl として修飾します。ここで、R は C18H37 または C8H17 などの直鎖アルキル基です。ただし、固定相の非極性の性質により、順相クロマトグラフィーとは対照的に、サンプル混合物中の極性の低い分析対象物は保持時間が長くなる傾向があります。
図 2:逆相クロマトグラフィー – 溶出
さらに、移動相に水を追加することで保持時間を長くすることができます。これにより、非極性分析物と固定相の間の疎水性相互作用が増加します。また、逆相クロマトグラフィーの移動相は極性であり、サンプル混合物中の極性分析物を洗い流します。これにより、サンプル混合物中の非極性検体の分離が容易になります。さらに、移動相の表面張力とその pH は、保持時間に影響を与えます。
順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーの類似点
- 順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーには 2 つのタイプがありますのクロマトグラフィー技術の概要。
- 回路図の計測器には デガッサー、 サンプラーが含まれます、ポンプ、および検出器。
- どちらも高圧下で動作します。
- さらに、それらの典型的な列のサイズは 2.1 です直径–4.6mm、長さ30–250mm。
- どちらも少量のサンプルを分離します。
- 分離はさまざまな程度に基づいていますサンプルの成分と吸着粒子との相互作用。これらの相互作用は温度に依存します。
- 小さい吸着粒子 (2 ～ 50 μm の平均粒子サイズ） 両方のタイプのクロマトグラフィーに高分解能の力を与えます。
- さらに、どちらのタイプのクロマトグラフィーでもサンプル成分の定量分析。
- 1 回あたり約 2 ～ 60 分かかります。サンプルですが、並行分析は許可されていません。
- クロマトグラフィーの保持時間は分析物とカラムの相互作用を増やすことで増加します。
- 極性を変えることで検体を溶出できます移動相の極性が固定相の極性に似ています。
順相と逆相クロマトグラフィーの違い
定義
順相クロマトグラフィーとは、2 つの相の間で混合物の成分を分配できる分離方法を指します。一方は極性固定相で、移動相は非極性です。 .対照的に、逆相クロマトグラフィーは、移動相が固定相よりも極性が高い分離方法を指します。
進化
順相クロマトグラフィーは、1970 年代に液体クロマトグラフィーの形で発展しました。しかし、逆相クロマトグラフィーは最近進化した HPLC の形式です。
定常期
さらに、順相クロマトグラフィーは主に純粋なシリカである極性固定相を使用しますが、逆相クロマトグラフィーは非極性固定相を使用します。疎水性の長鎖。
移動相
順相クロマトグラフィーは、主にクロロホルムである非極性の非水性溶媒を移動相として使用しますが、逆相クロマトグラフィーは、主に水である極性移動相を使用します。メタノールまたはアセトニトリル。
分離の種類
さらに、順相クロマトグラフィーはカラム内での保持時間が長い極性の分析物を分離しますが、逆相クロマトグラフィーはカラム内での保持時間が長い極性の低い分析物を分離します。
移動相の分析物
順相クロマトグラフィーでは、移動相は分離の開始時に非極性分析物を運びますが、逆相クロマトグラフィーでは、移動相は極性分析物を運びます。
保持時間を長くする
無極性移動相は順相クロマトグラフィーの保持時間を増加させ、極性移動相は逆相クロマトグラフィーの保持時間を増加させます。
溶出
順相クロマトグラフィーでは移動相の極性を上げることで分析対象物を溶出できますが、逆相クロマトグラフィーでは移動相の極性を下げることで分析対象物を溶出できます。
固定相の特徴
順相クロマトグラフィーの固定相には水またはプロトン性有機溶媒の層が含まれますが、逆相クロマトグラフィーの固定相には水またはプロトン性溶媒の層が含まれません。
保持時間の再現性
さらに、順相クロマトグラフィーは保持時間の再現性が低く、逆相クロマトグラフィーは保持時間の再現性が高くなります。
コラムの損傷
順相クロマトグラフィーのカラムは傷つきやすく、逆相クロマトグラフィーのカラムは傷つきにくいです。
結論
順相クロマトグラフィーは、極性の固定相と非極性の移動相を使用する HPLC の一種です。この結果、固定相の吸収剤に対する相互作用の程度に基づいて極性分析物を分離しながら、混合物の非極性分析物がカラムから容易に移動します。一方、逆相クロマトグラフィーは最近の HPLC の一種で、非極性の固定相と極性の移動相を使用します。したがって、極性分析物は移動相とともにカラムの外に移動し、固定相との相互作用の程度に基づいて非極性分析物を分離できます。したがって、順相クロマトグラフィーと逆相クロマトグラフィーの主な違いは、固定相と移動相のタイプです。
