材料:
1。脱イオン水
2。リン酸二水素カリウム(KH2PO4)
3。リン酸ナトリウム(Na2HPO4)
4。PHメーター
5。磁気炒め物または攪拌棒
6。体積フラスコ(例:1000 ml)
7。卒業したシリンダーまたはピペット
試薬:
1。0.2Mジヒドロゲンリン酸カリウム(KH2PO4)溶液:1000 mLの脱イオン水に17.41 gのKH2PO4を溶解します。
2。0.2M水素ナトリウムリン酸ナトリウム(Na2HPO4)溶液:1000 mLの脱イオン水に28.48 gのNa2HPO4を溶解します。
手順:
1. pH 7.5で1000 mLのリン酸緩衝液を準備するために必要な0.2 m kh2PO4および0.2 m Na2HPO4溶液の容積を計算します。 Henderson-Hasselbalch方程式を使用してください。
ph =pka + log([a-]/[ha])
どこ:
-PHは望ましいpH(7.5)です
-PKAはリン酸の解離定数です(7.21)
- [a-]は共役ベースの濃度(Na2HPO4)です
- [ha]は弱酸の濃度です(kh2po4)
方程式を再配置し、値を置き換えます。
log([a-]/[ha])=ph -pka =7.5-7.21 =0.29
[a-]/[ha] =antilog(0.29)=1.959
目的のバッファー濃度(0.1 m)および計算比([a-]/[ha])から、0.2 m kh2po4および0.2 m Na2HPO4溶液の容積を決定します。
V(kh2po4)=[ha] / [総濃度] *総量
=0.1 m /(0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml
=500 ml
V(Na2HPO4)=[a-] / [総濃度] *総量
=0.1 m /(0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml
=500 ml
2。500mLの0.2 m kh2PO4溶液を1000 mLの体積フラスコに移します。
3. 500 mLの0.2 M NA2HPO4溶液を体積フラスコに加えます。
4.フラスコを静かに渦巻かせて、ソリューションを混ぜます。
5. pHメーターを使用してバッファーのpHを確認します。必要に応じて、0.2 m kh2po4または0.2 m Na2HPO4溶液のいずれかの少量を追加して、pHを7.5に調整します。
6.必要に応じて、脱イオン水を加えて、バッファーの最終容積を最大1000 mLにします。
7.磁気炒め物または攪拌棒を使用して、バッファーを徹底的に混ぜます。
PH 7.5の0.1 Mリン酸緩衝液が使用できるようになりました。実験条件に合った適切な温度でバッファーを保管してください。