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pH 7.5のリン酸緩衝液をどのように調製しますか?

pH 7.5のリン酸緩衝液を準備するには、次の材料と試薬が必要になります。

材料:

1。脱イオン水

2。リン酸二水素カリウム(KH2PO4)

3。リン酸ナトリウム(Na2HPO4)

4。PHメーター

5。磁気炒め物または攪拌棒

6。体積フラスコ(例:1000 ml)

7。卒業したシリンダーまたはピペット

試薬:

1。0.2Mジヒドロゲンリン酸カリウム(KH2PO4)溶液:1000 mLの脱イオン水に17.41 gのKH2PO4を溶解します。

2。0.2M水素ナトリウムリン酸ナトリウム(Na2HPO4)溶液:1000 mLの脱イオン水に28.48 gのNa2HPO4を溶解します。

手順:

1. pH 7.5で1000 mLのリン酸緩衝液を準備するために必要な0.2 m kh2PO4および0.2 m Na2HPO4溶液の容積を計算します。 Henderson-Hasselbalch方程式を使用してください。

ph =pka + log([a-]/[ha])

どこ:

-PHは望ましいpH(7.5)です

-PKAはリン酸の解離定数です(7.21)

- [a-]は共役ベースの濃度(Na2HPO4)です

- [ha]は弱酸の濃度です(kh2po4)

方程式を再配置し、値を置き換えます。

log([a-]/[ha])=ph -pka =7.5-7.21 =0.29

[a-]/[ha] =antilog(0.29)=1.959

目的のバッファー濃度(0.1 m)および計算比([a-]/[ha])から、0.2 m kh2po4および0.2 m Na2HPO4溶液の容積を決定します。

V(kh2po4)=[ha] / [総濃度] *総量

=0.1 m /(0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml

=500 ml

V(Na2HPO4)=[a-] / [総濃度] *総量

=0.1 m /(0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml

=500 ml

2。500mLの0.2 m kh2PO4溶液を1000 mLの体積フラスコに移します。

3. 500 mLの0.2 M NA2HPO4溶液を体積フラスコに加えます。

4.フラスコを静かに渦巻かせて、ソリューションを混ぜます。

5. pHメーターを使用してバッファーのpHを確認します。必要に応じて、0.2 m kh2po4または0.2 m Na2HPO4溶液のいずれかの少量を追加して、pHを7.5に調整します。

6.必要に応じて、脱イオン水を加えて、バッファーの最終容積を最大1000 mLにします。

7.磁気炒め物または攪拌棒を使用して、バッファーを徹底的に混ぜます。

PH 7.5の0.1 Mリン酸緩衝液が使用できるようになりました。実験条件に合った適切な温度でバッファーを保管してください。

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