空白/参照の必要性を理解する
分光法(UV-vis、IRなど)またはクロマトグラフィーでは、次のために空白または参照が重要です。
* バックグラウンドの吸収/干渉が修正されます: 溶媒自体、キュベット、またはシステムの他のコンポーネントは、特定の波長で光を吸収する可能性があります。 空白は、測定からこれらの信号を排除し、分析物による信号を分離するのに役立ちます。
* ベースラインを設定します: 参照は比較のための出発点を確立し、吸光度または信号強度の変化を正確に測定できるようにします。
80%アセトン/水の空白/参照を選択
* 理想的な空白: 理想的な空白は、サンプルと同じ濃度と溶媒システムの分析物 *を除くすべての *を含むソリューションです。この場合、空白は水中の80%のアセトンになります。
なぜ純粋な水はしませんか?
* アセトン吸収: アセトンは、UV-Vis領域で著しい吸光度を持っています。純粋な水を空白として使用すると、サンプルのアセトンが分析物ではないにしても、吸光度の読みに寄与するため、測定値が歪んでしまいます。
空白を準備する方法:
1。同じ溶媒を使用します: サンプルに使用するのと同じ80%のアセトン/水混合物を使用して、空白を準備します。
2。一貫性を確保する: 空白がサンプルと同じ体積と温度であることを確認して、エラーを最小限に抑えてください。
3。最初に空白を実行します: サンプルを測定する前に、空白を楽器に通して「ゼロ」にします。これにより、ベースラインが設定されます。
追加の考慮事項:
* 他のコンポーネントからの干渉: サンプルに同じ波長で吸収される分析物以外のコンポーネントが含まれている場合、これらの干渉を修正するには、より洗練されたアプローチのような標準的な追加方法が必要になる場合があります。
* インストゥルメンタルバリエーション: 使用している特定の機器には、空白の準備と使用に関する独自のガイドラインがあります。ベストプラクティスについては、常にメーカーのマニュアルを参照してください。
例: 80%のアセトン/水で染料の溶液を分析している場合、染料なしで空白は80%アセトン/水 *になります。これにより、色素のみの吸光度信号を分離できます。