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タンパク質沈殿で硫酸アンモニウムが使用されるのはなぜですか?

硫酸アンモニウム((nh₄)₂so₄)は、いくつかの理由でタンパク質沈殿のために広く使用されている試薬です。

1。 塩漬け効果:

*硫酸アンモニウムは水に非常に溶け、溶液のイオン強度を増加させます。

*タンパク質は一般に、周囲の水和殻のために水溶液に溶けます。

*硫酸アンモニウムを追加すると、水分子のタンパク質と競合し、水分補給シェルが減少し、タンパク質溶解度が低下します。

*この「塩漬け」効果は、タンパク質の沈殿につながります。

2。 選択的降水量:

*異なるタンパク質は、塩濃度に対して感度が異なります。

*硫酸アンモニウム濃度を徐々に増加させることにより、溶解度に基づいてタンパク質を選択的に沈殿させることができます。

*これにより、異なる特性を持つタンパク質を分離できます。

3。 使いやすさ:

*硫酸アンモニウムは比較的安価で、すぐに入手できます。

*溶解するのは簡単で、溶液自体で沈殿しないため、簡単に使用できます。

4。 軽度の条件:

*硫酸アンモニウム沈殿は一般に軽度の方法であり、タンパク質を大幅に変性させないため、敏感なタンパク質の精製と濃縮に適しています。

5。 結晶化強化:

*硫酸アンモニウムは、構造分析に重要なタンパク質結晶化の促進に役立ちます。

それがどのように機能するか:

*塩漬け効果は、硫酸アンモニウムイオンとタンパク質表面との相互作用に基づいています。

*硫酸アンモニウム濃度が増加すると、イオンはタンパク質表面とより強く相互作用し、水和層を減らし、タンパク質が溶液から沈殿します。

重要な考慮事項:

*沈殿のための硫酸アンモニウムの最適濃度は、タンパク質によって異なります。

*濃度を徐々に調整し、降水プロセスを監視して最適な結果を達成することが重要です。

* pHや温度などの他の要因もタンパク質の沈殿に影響します。

全体として、硫酸アンモニウムはタンパク質沈殿のための用途の多い効率的な試薬であり、有効性、手頃な価格、および軽度のバランスを提供します。

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