高性能液体クロマトグラフィー(HPLC):故障
高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)は、複雑な混合物のコンポーネントを分離、識別、定量化するために使用される強力な分析手法です。これは、分子の洗練されたソートシステムのようなもので、創薬から環境分析に至るまで、多様な用途に高解像度と感度を提供します。
これがどのように機能するかです:
1。サンプルはじめに: サンプルはシステムに注入され、通常は適切な溶媒に溶解します。
2。移動相: サンプルは、「移動相」と呼ばれる液体溶媒によってシステムを介して運ばれます。このフェーズは、高圧下でカラムを介して汲み上げられ、一貫した流量が確保されます。
3。定常期: 柱には、「定常期」として知られる固体材料が充填されています。このフェーズは、サンプルのコンポーネントと異なる方法で相互作用し、分離につながります。
4。分離: サンプルが列を通過すると、コンポーネントは物理的および化学的特性に基づいて固定相と相互作用します。さまざまなコンポーネントが異なって相互作用すると、保持時間が変化します(コンポーネントが列を通過するのにかかる時間)。
5。検出: 分離後、成分はカラムから溶出し、特定の検出器によって検出されます。この検出器は、特にUV/VIS分光光度計、蛍光検出器、または質量分析計などです。
6。データ分析: 検出器は、クロマトグラムに変換される信号を生成します。このクロマトグラムは、分離された成分の視覚的な表現であり、保持時間とピーク領域を示しています。
HPLCの高性能の鍵は、そのコンポーネントにあります:
* 高圧: システムは高圧、通常100〜400 barで動作し、より速い流量とより良い解像度を可能にします。
* 小さな粒子サイズ: 固定相は、通常1.8〜10 µmの小さな粒子で構成されており、サンプル成分との相互作用のためのより大きな表面積を提供し、優れた分離につながります。
* 正確なフロー制御: システムはポンプを利用して、移動相の正確で一定の流れを提供し、再現可能な結果を確保します。
HPLCのタイプ:
* 逆相クロマトグラフィー: これは最も一般的なタイプであり、固定相は非極性で、移動相は極性です。コンポーネントは、疎水性に基づいて分離され、より多くの疎水性成分が後で溶出します。
* 通常の相クロマトグラフィ: このタイプでは、固定相は極性であり、移動相は非極性です。コンポーネントは極性に基づいて分離され、より多くの極性成分が後で溶出します。
* イオン交換クロマトグラフィ: この手法は、充電された固定相とイオン移動相を使用して、電荷に基づいてコンポーネントを分離します。
HPLCのアプリケーション:
* 創薬と開発: 医薬品の純度分析、不純物の特定、薬物動態研究。
* 環境監視: 水、大気、土壌中の汚染物質の分析。
* 食品化学: 食品添加物、汚染物質、栄養素の分析。
* 法医学: 薬物、毒、爆発物の分析。
* 生化学とバイオテクノロジー: タンパク質、ペプチド、およびその他の生物学的分子の分析。
全体として、HPLCは、高感度、解像度、および再現性を備えた強力で多用途の分析手法です。それは多くの科学分野で重要な役割を果たし、複雑な混合物の識別、定量化、および精製を支援します。