* アミノ酸にはイオン化可能なグループがあります: 各アミノ酸には、カルボキシル基(-COOH)とアミノ基(-NH2)の少なくとも2つのイオン化グループがあります。これらのグループは、溶液のpHに応じて陽子(H+)を獲得または失うことができます。
* 等電点(PI): 各アミノ酸には、正味電荷がゼロである等電点(PI)と呼ばれる特定のpH値があります。このpHでは、アミノ酸は亜熱線として存在します(陽性と負の電荷の両方のバランスが取れます)。
* 電界での移動: 電気泳動中に電界にさらされると、正味の正電荷を持つアミノ酸は負の電極(カソード)に向かって移動し、正味負電荷のあるアミノ酸は正電極(アノード)に向かって移動します。
* 電荷に対するpH効果:
* pi未満のph: アミノ酸はプロトン化され、正味の正電荷を運びます。
* pi上のpH: アミノ酸は脱プロトン化され、正味の負の電荷を運びます。
* piでのpH: アミノ酸には正味電荷がなく、移動しません。
したがって、電気泳動で使用されるバッファー溶液のpHは、アミノ酸の分離に直接影響します。
* 最適な分離: アミノ酸のPIとわずかに異なるpHを使用すると、純電荷が確保され、異なる速度で移動し、効果的な分離につながります。
* 分離が悪い: pHがアミノ酸のPIに近すぎる場合、純電荷が非常に低く、ゆっくりと移動し、解像度が低下します。
* 分離なし: pHがアミノ酸のPIに正確にある場合、正味電荷がなく、まったく移動しません。
結論として、pHはアミノ酸の電荷状態を決定し、電界での移動に影響を与え、最終的に分離効率を決定するため、電気泳動の重要な要因です。