1。サイズと解像度：
* 小サイズ： 多くのオルガネラは信じられないほど小さく、多くの場合、強力な光顕微鏡の分解力を下回っています。これは、光波が光の波長よりも近い点を区別できず、画像を曖昧にすることを意味します。
* 解像度制限： 光顕微鏡には、約200ナノメートルの理論的解像度の制限があります。 リボソームやゴルジ装置の水槽のように、これよりも小さいオルガネラは、ぼやけたり不明瞭に見えたりします。
2。染色技術：
* コントラストの欠如： 多くのオルガネラは、周囲の細胞質と同様の屈折率を持っています。このコントラストの欠如により、Brightfield顕微鏡であっても、背景と区別するのが難しくなります。
* 不十分な染色： 染色技術は、特定の構造を視覚化するために重要です。 汚れが特定のオルガネラにうまく結合しない場合、それは見えないままであるか、あまり定義されていないように見えます。
3。サンプルの準備：
* artifacts： 顕微鏡のために細胞を準備するプロセスは、オルガネラをあいまいにするアーティファクトを導入することができます。たとえば、固定、埋め込み、およびセクションは、細胞構造を歪める可能性があります。
* 細胞の厚さ： 細胞が厚すぎると、光が不均一に散らばる可能性があり、特定のオルガネラを識別することが困難になります。
4。顕微鏡の種類：
* 光学顕微鏡： 強力ですが、光学顕微鏡は、細かい構造を解決することに固有の制限があります。
* 電子顕微鏡： 透過型電子顕微鏡（TEM）などの技術は、はるかに高い分解能を提供し、リボソームやミトコンドリアの内部構造などのより小さなオルガネラの視覚化を可能にします。ただし、TEMには広範なサンプル準備が必要であり、アーティファクトを導入することもできます。
5。細胞の生理学的状態：
* 動的構造： 小胞体（ER）やゴルジ体のようないくつかのオルガネラは、形と位置が常に変化しています。この動的な性質は、固定試験片ではあまり定義されていないように見えることがあります。
6。ライブセルイメージング：
* 動き： 生きている細胞は動的であり、彼らのオルガネラは絶えず動き、変化します。 蛍光顕微鏡のような高度な技術を使用しても、これらの構造のイメージングは困難な場合があります。
* セルラープロセス： タンパク質合成や膜の人身売買などの進行中の細胞プロセスも、オルガネラの透明度に影響を与える可能性があります。
要約すると、いくつかの要因が顕微鏡下での細胞オルガネラの可視性に影響を与える可能性があります。これらの制限を理解することで、研究者は適切な顕微鏡技術とサンプル調製方法を選択して、観察の明確さを最大化できます。
