1。イオン交換列の調製：
- イオン交換カラムには、反対に帯電した分子（イオン）を引き付けて結合できる荷電基を含む樹脂が詰め込まれています。
- 樹脂は、積極的に帯電（陽イオン交換樹脂）または負に帯電した（アニオン交換樹脂）のいずれかです。
2。サンプルアプリケーション：
- アミノ酸混合またはサンプルがイオン交換カラムに適用されます。
3。バッファソリューション：
- さまざまなpHおよび塩濃度の異なるバッファー溶液がカラムに渡されます。
4。静電相互作用：
- アミノ酸は、さまざまな充電された機能グループの存在により、異なるpH値で異なる正味電荷を持っています。
- バッファ溶液がカラムを通過すると、アミノ酸は正味電荷に基づいて樹脂の帯電したグループと相互作用します。
- 正に帯電したアミノ酸（カチオン）は、カチオン交換クロマトグラフィーで負に帯電した樹脂に結合し、負に帯電したアミノ酸（陰イオン）は、アニオン交換クロマトグラフィーの正の帯電樹脂に結合します。
5。溶出：
- 緩衝液のpHまたは塩濃度を変化させることにより、アミノ酸と樹脂の間の静電相互作用の強度を変更できます。
- 緩衝液の条件が変化すると、異なるアミノ酸が異なる時間にカラムから溶出（洗い流されます）。
- この溶出プロセスは、電荷の違いに基づいてアミノ酸を分離します。
6。検出と収集：
- カラムからアミノ酸が溶出すると、紫外線（UV-vis）検出器などの検出器を使用して検出されます。
- その後、アミノ酸は別々の画分として収集できます。
7。分別と分析：
- 収集された画分は、薄層クロマトグラフィー（TLC）や電気泳動などの技術を使用して、分離されたアミノ酸の同一性を確認して、さらに分析および特性化されます。
イオン交換クロマトグラフィーは、アミノ酸、タンパク質、およびその他の帯電した分子の分離と精製に広く使用されています。特定の電荷特性に基づいて、化合物の分離を正確に制御できます。
