1。 Biuretテスト:
* 原則: このテストは、タンパク質のアミノ酸間の結合であるペプチド結合の存在を検出します。
* 手順:
*サンプルに数滴のビュレット試薬(強いアルカリの銅溶液の溶液)を追加します。
*バイオレットブルーの色は、タンパク質の存在を確認する肯定的な結果を示します。
* 利点: 比較的敏感で広く使用されています。
* 短所: タンパク質に特異的ではありません。ペプチド結合を含む他の化合物も肯定的な反応を与える可能性があるためです。
2。ニンヒドリン検査:
* 原則: このテストは、すべてのアミノ酸に存在するα-アミノ基の存在を検出します。
* 手順:
*ニンヒドリン試薬でサンプルを加熱します。
*紫色の青色は、自由アミノ基の存在を示している肯定的な結果を示します。
* 利点: 非常に敏感で、非常に少量のアミノ酸を検出できます。
* 短所: α-アミノ基を含む他の化合物も反応する可能性があるため、タンパク質に特異的ではありません。
3。 Xanthoproteicテスト:
* 原則: このテストは、チロシンやトリプトファンのような芳香族アミノ酸の存在を検出します。
* 手順:
*サンプルに濃縮硝酸を加えます。
*混合物を優しく加熱します。
*黄色は肯定的な結果を示し、芳香族アミノ酸の存在を示します。
*アンモニアを添加すると、色がオレンジ黄色にさらに増強されます。
* 利点: 芳香族アミノ酸を含むタンパク質に比較的特異的。
* 短所: 他のテストほど敏感ではありません。
4。ミロンのテスト:
* 原則: このテストは、芳香族アミノ酸であるチロシンの存在を検出します。
* 手順:
*ミロンの試薬(硝酸中の水銀硝酸溶液)をサンプルに追加します。
*混合物を優しく加熱します。
*加熱時に赤に変わる白い沈殿物は、チロシンの存在を確認する陽性の結果を示します。
* 利点: タンパク質の一般的なアミノ酸であるチロシンに対して比較的特異的。
* 短所: 他のテストほど敏感ではありません。
5。ブラッドフォードアッセイ:
* 原則: これは、タンパク質に結合する染料を使用してサンプルのタンパク質濃度を測定する比色測定アッセイです。
* 手順:
*サンプルをクーマシーブリリアントブルー染料と混ぜます。
*色素はタンパク質に結合し、分光光度計を使用して測定できる色の変化をもたらします。
* 利点: 非常に敏感で正確で、タンパク質の定量化に広く使用されています。
* 短所: 分光光度計が必要であり、特定の洗剤の影響を受ける可能性があります。
適切なテストの選択:
特定の状況の最良のテストは、次のような要因に依存します。
* 感度: サンプルにはどのくらいのタンパク質が予想されますか?
* 特異性: 特定のタイプのタンパク質を検出する必要がありますか、それともタンパク質だけを検出する必要がありますか?
* リソース: 必要な試薬と機器にアクセスできますか?
多くの場合、複数のテストを使用してタンパク質の存在を確認し、それらの組成をより完全に理解することをお勧めします。