1。適切なクロマトグラフィーテクニックを選択してください:
* 薄層クロマトグラフィー(TLC): これはシンプルで多用途のテクニックです。固定相(通常はシリカゲルプレート)と移動相(溶媒)に対する親和性に基づいてコンポーネントを分離します。色は表示されませんが、以下を使用して分離されたコンポーネントを視覚化できます。
* uv光: 多くの物質はUV光を吸収し、UVランプの下で見えるようにします。
* 視覚化試薬: 特定の化学試薬は、分離された化合物と反応して、色付きの斑点を生成できます。
* ヨウ素蒸気: ヨウ素蒸気は、多くの有機化合物と反応して茶色の斑点を形成することができます。
* ガスクロマトグラフィー(GC): この手法は、沸点に基づいて揮発性物質を分離します。通常、次のようなコンポーネントを識別および定量化できる検出器と組み合わされています。
* 火炎イオン化検出器(FID): これは有機化合物に敏感です。
* 質量分析計(MS): これにより、分離された化合物に関する詳細な構造情報が提供されます。
* 高性能液体クロマトグラフィー(HPLC): この強力な手法は、極性と固定相との相互作用に基づいてコンポーネントを分離します。多くの場合、複雑な混合物の分析に使用され、通常は次のような検出器と組み合わされています。
* uv/vis検出器: UVまたは可視光を吸収する化合物を検出します。
* 屈折指数検出器: 化合物の存在によって引き起こされる溶出溶媒の屈折率の変化を検出します。
2。視覚化と識別:
* uv光: 無色の化合物でさえ、多くの化合物が紫外線を吸収します。 UVランプを使用して、TLCプレートに分離された化合物のスポットを見ることができます。
* 視覚化試薬: 異なる試薬は化合物の特定の官能基と反応して、TLCプレートに色のついたスポットを作成します。
* 検出器: GCとHPLCは、検出器を使用して、カラムから溶出するコンポーネントの存在を信号します。
3。定量分析:
* キャリブレーション標準: サンプルと一緒に既知の量の物質を実行することにより、クロマトグラフィーの結果を使用して、サンプル内の物質の濃度を決定できます。
* ピークの下の領域: GCおよびHPLCでは、ピークの下の領域は物質の量に比例します。
例:
糖(グルコース、フルクトース、スクロース)の混合物を分析したいと想像してください。これらの糖は無色ですが、TLCまたはHPLCを使用して分離できます。
* tlc: 混合物を実行した後、アニリン - フタレート(糖と反応して色のついた斑点を生成する)などの試薬を使用して、分離された成分を視覚化できます。
* HPLC: UV/Vis検出器を使用して、カラムから溶出する際に各砂糖に対応するピークを見ることができます。ピーク領域を既知の標準と比較することにより、混合物中の各糖の相対量を決定できます。
適切なクロマトグラフィー技術と視覚化方法を選択することは、分析している特定の物質に依存することを忘れないでください。